Teknik PCR pertama kali dikembangkan oleh Karry Mullis pada tahun 1985.
Teknik PCR dapat digunakan untuk mengamplifikasi segmen DNA dalam jumlah jutaan
kali hanya dalam beberapa jam.
Awalnya amplifikasi dilakukan pada tubuh bakteri dan memerlukan waktu
beberapa minggu. Dengan menggunakan PCR, proses amplifikasi dapat dilakukan dalam
tabung dan hanya memerlukan waktu beberapa jam. PCR menjadi sarana yang sensitif,
selektif, dan sangat cermat untuk memperbanyak rangkaian DNA yang diinginkan.
Spesifisitas ini berdasarkan pada penggunaan 2 primer oligonukleotida yang
berhibridisasi menjadi rangkaian komplementer pada untai DNA yang berlawanan.
Penemuan awal dari teknik PCR didasarkan pada tiga waterbaths yang
mempunyai temperatur yang berbeda. Thermal-cycler pertama kali dipublikasikan pada
tahun 1986, akan tetapi DNA polymerase awal yang digunakan masih belum
thermostable, dan harus ditambahkan disetiap siklusnya.
Kelemahan lain temperatur
37°C yang digunakan bisa dan menyebabkan non-specific priming, sehingga
menghasilkan produk yang tidak dikehendaki. Taq DNA polymerase yang diisolasi dari
bakteri Thermus aquaticus (Taq) dikembangkan pada tahun 1988. Enzim ini tahan
sampai temperature mendidih 100°C, dan aktifitas maksimal pada temperatur 92-95°C.
Dengan diketemukannya teknik PCR di samping juga teknik-teknik lain seperti
sekuensing DNA, telah merevolusi bidang sains dan teknologi khususnya di bidang
diagnosa penyakit genetik, kedokteran forensik dan evolusi molekular.
0 komentar